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杭州厚泽生物科技有限公司
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公司新闻/正文
浓度测定新选择，助力核酸定量
846 人阅读发布时间：2018-12-19 09:04
在分子生物学实验中，核酸定量是必备的一个过程，包括初提产物的核酸（gDNA 和 Total RNA）质控，或者 PCR 产品和 NGS 文库质控。目前常见的定量仪器是 Nanodrop 和 Qubit，前者只需一两微升的样品，不需额外试剂，就可以利用核酸的紫外吸收特性，得到样本浓度值，但当样本为 DNA，却混有 RNA 时定量数据会出现较大偏差；而后者 Qubit 采用特异荧光染料法，可以特异地与不同种类的核酸链相结合，并在特定波长光源的激发下，发出荧光。Qubit 定量可以更加准确，但是需要配套试剂，价格也比较高。
Qsep100 全自动核酸蛋白分析系统，在原来检测核酸片段长度的功能上增加了浓度定量功能，可以一步解决定性和定量两个步骤，特别适合 NGS 平台的文库质控流程。
例一：现对一个原浓度样本为 6.5ng/ul（Qubit）的文库样本进行定量分析，以 2 倍梯度，稀释 5 个梯度，如下：
表中数据显示，S2 卡夹检测同一个样本的五个不同浓度，所得 Avg.size 基本一致，最大值和最小值偏差为 2.7%；
以各管稀释倍数的倒数为横坐标 ，各管检测所得的浓度为纵坐标，得到图中的一次函数方程，拟合度 R2=0.9989；所测得浓度线性关系良好。
例二：稳定性测试，对同一个样本分 3 管做独立检测如下：
表中数据显示，3 管样本检测所得 Avg.size 基本一致，浓度最大值和最小值偏差为 1.7%，表明 S2 卡夹检测同一个样本，3 次重复测得的片段分布及浓度定量重复性好，结果稳定 。
图片来源：杭州厚泽生物科技有限公司
Qsep100 全自动核酸蛋白分析系统，在原来检测核酸片段长度的功能上增加了浓度定量功能，可以一步解决定性和定量两个步骤，特别适合 NGS 平台的文库质控流程。
例一：现对一个原浓度样本为 6.5ng/ul（Qubit）的文库样本进行定量分析，以 2 倍梯度，稀释 5 个梯度，如下：
表中数据显示，S2 卡夹检测同一个样本的五个不同浓度，所得 Avg.size 基本一致，最大值和最小值偏差为 2.7%；
以各管稀释倍数的倒数为横坐标 ，各管检测所得的浓度为纵坐标，得到图中的一次函数方程，拟合度 R2=0.9989；所测得浓度线性关系良好。
例二：稳定性测试，对同一个样本分 3 管做独立检测如下：
表中数据显示，3 管样本检测所得 Avg.size 基本一致，浓度最大值和最小值偏差为 1.7%，表明 S2 卡夹检测同一个样本，3 次重复测得的片段分布及浓度定量重复性好，结果稳定 。
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